產品特點
◎提取DNA純度高,無抑制劑,A260/A280為1.7-1.9;
◎產率高,同樣的樣本量提取的DNA更多;
◎可用于漱口水樣本中DNA的提取,提取后的DNA可用于核酸檢測使用;
◎不含苯酚和氯仿等有毒溶劑,安全無毒。
產品介紹
BIOG DNA Mouthwash Kit是專門用于提取漱口水中DNA的試劑盒。BIOG DNA Mouthwash Kit采用了最新的優質進口離子膜,裂解液和洗脫液經過多次優化,能高效地分離DNA。提取得到的DNA較其它品牌的同類試劑盒產量更大,純度更高,最大限度地去除了蛋白、色素、脂類等雜質污染,可以直接應用于PCR、熒光定量PCR和各種酶切試驗等。
操作步驟
1. 請自行準備:無水乙醇、1.5mL離心管。
2. 取出析出液和洗滌液,按以下操作:
a) 洗滌液A:21mL加入9mL無水乙醇,混勻;42mL加入18mL無水乙醇,混勻。
b) 洗滌液B:9mL加入21mL無水乙醇,混勻;18mL加入42mL無水乙醇,混勻。
c) 配制好的洗滌液如出現沉淀,可在37℃溶解,搖勻后使用。
3. 取漱口水1mL至1.5mL于1.5mL離心管中,12,000 rpm 離心5 min,棄上清,剩余100μL上清,充分振蕩混勻15秒。
4. 加入4μLDNA Carrier混合均勻,加入200μL 裂解液及20μL 消化液,振蕩混勻,56℃水浴10 分鐘。
5. 加入700μL無水乙醇,輕輕顛倒混勻,如有半透明懸浮物,不影響DNA的提取與后續實驗。
6. 將吸附柱放入收集管內,將512μL上述溶液轉入吸附柱內,靜置2 分鐘,12,000 rpm 4℃離心1 分鐘,棄收集管內廢液;
7. 將吸附柱放回收集管內,將剩余512μL溶液轉移至吸附柱內,重復步驟6。
8. 將吸附柱放回收集管內,加500μL 洗滌液A至吸附柱內,12,000 rpm 4℃離心1 分鐘,棄收集管內廢液。
9. 將吸附柱放回收集管內,加500μL 洗滌液B至吸附柱內,靜置2 分鐘,12,000 rpm 4℃離心1 分鐘,棄收集管內廢液。
10. 將吸附柱放回收集管內,12,000 rpm 4℃離心2 min,離去殘留的洗滌液。
11. 取出吸附柱,放入新的1.5 mL 離心管內,加入30-60 μL 洗脫液,靜置3 min,12,000 rpm 4℃ 離心2 min,收集DNA溶液。提取的DNA即可用于下一步實驗或-20℃保存。
注意事項:
1. 裂解液、洗滌液含有刺激性化學物質,操作過程請做好防護措施,避免直接接觸皮膚,防止吸入口鼻。如不慎沾染皮膚或眼睛,請立即用清水或生理鹽水沖洗,必要時請就醫。
2. 裂解液如有白色絮狀物析出屬正常現象,置于37℃水浴中溶解即可。