操作步驟

1. 請自行準備：無水乙醇、1.5mL 離心管。

2. 取出洗滌液，按以下操作：

a) 洗滌液 A：按終濃度 30%比例加入無水乙醇，如 7mL 加入 3mL 無水乙醇；21mL 加入 9mL 無水乙醇，充分混勻。

b) 洗滌液 B：按終濃度 70%比例加入無水乙醇，如 3mL 加入 7mL 無水乙醇；9mL 加入 21mL 無水乙醇，充分混勻。

c) 配制好的洗滌液如出現沉淀，可在 37℃溶解，搖勻后使用。

3. 取 1.5mL 離心管，加入 200μL 樣本，4μL DNAConc.，混合均勻，再加入 200μL 裂解液及 20μL 消化液，振蕩混勻，65℃水浴 10 分鐘。

4. 加入 0.9mL 無水乙醇，輕輕顛倒混勻，如有半透明懸浮物，不影響 DNA 的提取與后續實驗。

5. 將吸附柱放入收集管內，將 700μL 上述溶液轉入吸附柱內，12,000 rpm 4℃離心 1 分鐘，棄收集管內廢液；

6. 將吸附柱放回收集管內，將剩余溶液轉移至吸附柱內，重復步驟 5。

7. 將吸附柱放回收集管內，加 500μL 洗滌液 A 至吸附柱內，靜置 2 分鐘，12,000 rpm 離心 1 分鐘，棄收集管內廢液。

8. 將吸附柱放回收集管內，加 500μL 洗滌液 B 至吸附柱內，12,000 rpm 離心 1 分鐘，棄收集管內廢液。

9. 將吸附柱放回收集管內，12,000 rpm 離心 3 分鐘，離去殘留的洗滌液。同時，按每份樣本 30μL 取洗脫液（如 10 份提取樣本，即取 300μL洗脫液），放置于滅菌 1.5mL 離心管，65℃預熱 2 分鐘。

10. 取出吸附柱，放入新的 1.5 mL 離心管內，加入上述已預熱的 30μL 洗脫液，靜置 2 分鐘，12,000 rpm 離心 2 分鐘，收集 DNA 溶液，提取的 DNA 即可用于下一步實驗或-20℃保存。

注意事項：

1. 裂解液、洗滌液含有刺激性化學物質，操作過程請做好防護措施，避免直接接觸皮膚，防止吸入口鼻。如不慎沾染皮膚或眼睛，請立即用清水或生理鹽水沖洗，必要時請就醫。

2. 裂解液如有白色絮狀物析出屬正常現象，置于 37℃水浴中溶解即可。

3.為提高提取的 DNA 濃度，可以減少洗脫液用量，但最低不要少于 15μL 。