產品特點
操作簡便快速,20分鐘左右可獲得理想的DNA;
◎提取DNA純度高,無抑制劑,1.7<A260/A280≤2.0;
◎產量更高,較國內同類產品高出20%;
◎樣本范圍廣,可用于新鮮、冷凍或陳舊的全血樣本。
產品介紹
BIOG Blood DNA Isolate Kit是專門用于血液DNA的提取純化。本試劑盒采用獨特的裂解液配方,可直接從新鮮、冷凍或陳舊的全血中提取高質量的基因組DNA,也可以直接提取得到血液中感染的細菌或轉移的腫瘤細胞DNA, 省去了一般血液DNA提取試劑盒所需的白細胞分離步驟,操作簡便快速,只需20分鐘左右即可完成血液DNA提取,并且DNA提取得率較高,可在200 μl 全血中提取2-5ug左右基因組DNA。BIOG Blood DNA Isolate Kit采用了最新的優質離子膜,裂解液和洗脫液經過多次優化,提取得到的DNA純度更高,最大限度地去除了蛋白、色素、脂類等雜質污染,可以直接應用于PCR、熒光定量PCR和各種酶切試驗等。
操作步驟?(請自行準備無水乙醇、異丙醇和滅菌1.5mL離心管):
1. 取出洗滌液,按以下操作:
a) 洗滌液A:21mL加入9mL無水乙醇;42mL加入18mL無水乙醇,混勻。
b) 洗滌液B:18mL加入42mL無水乙醇;36mL加入84mL無水乙醇,混勻。
c) 配制好的洗滌液如出現沉淀,可在37℃溶解,搖勻后使用。
2. 取1.5mL離心管,加入200μL血液樣本,再加入200μL 裂解液及40μL 消化液,振蕩混勻,65℃水浴10 分鐘。
3. 加入150μL異丙醇(總體積的25%),混合均勻,如有半透明懸浮物,不影響DNA的提取與后續實驗。
4. 將吸附柱放入收集管內,將上述溶液轉入吸附柱內,12,000 rpm 離心1 分鐘,棄收集管內廢液;
5. 將吸附柱放回收集管內,加500μL 洗滌液A至吸附柱內,靜置1分鐘,12,000 rpm 離心1 分鐘,棄收集管內廢液。
6. 將吸附柱放回收集管內,加500μL 洗滌液B至吸附柱內,12,000 rpm 離心1 分鐘,棄收集管內廢液。
7. 將吸附柱放回收集管內,加500μL 洗滌液B至吸附柱內,12,000 rpm 離心1 分鐘,棄收集管內廢液。
8. 按每份樣本40μL 取洗脫液(如10份提取樣本,即取400μL 洗脫液),放置于滅菌1.5mL離心管,65℃預熱。
9. 將吸附柱放回收集管內,12,000 rpm 離心2 分鐘,離去殘留的洗滌液。
10. 取出吸附柱,放入新的1.5 mL 滅菌離心管內,在吸附柱中心加入40 μL 預熱洗脫液,靜置2分鐘,12,000 rpm 離心1分鐘,收集DNA溶液。提取的DNA即可用于下一步實驗或-20℃保存。
注意事項:
1.裂解液、洗滌液含有刺激性化學物質,操作過程請做好防護措施,避免直接接觸皮膚,防止吸入口鼻。如不慎沾染皮膚或眼睛,請立即用清水或生理鹽水沖洗,必要時請就醫。
2.如血液量不足200μL,請用0.85% 生理鹽水補至200μL;如血液量超出200μL,請使用BIOG中量血液DNA提取試劑盒或BIOG血液富集DNA提取試劑盒。
3. 如果提取的血液為鳥類、禽類的血液,因有核紅細胞較多,提取血液量應適當減少,研究者應先進行優化實驗,選擇合適用量。
4.提取的DNA如暫不使用,應-20℃保存。