產(chǎn)品特點
◎提取DNA純度高，無抑制劑，A260/A280為1.7-1.9；
◎產(chǎn)率高，同樣的樣本量提取的DNA更多；
◎不含苯酚和氯仿等有毒溶劑，安全無毒；
◎細(xì)胞壁較厚的革蘭氏陽性菌和真菌也有較好的提取效果。
產(chǎn)品介紹
BIOG DNAFungi & Bacteria Kit是專門用于從各種細(xì)菌和真菌樣本中提取基因組DNA的試劑盒。BIOG DNAFungi & Bacteria Kit采用特別配制的菌體裂解酶裂解真菌和細(xì)菌，采用復(fù)合消化液消化菌體中的蛋白質(zhì)，使菌體DNA更容易釋放出來，因而本試劑盒菌體DNA提取產(chǎn)率較高。BIOG DNAFungi & Bacteria Kitt采用了最新的離子膜技術(shù)并反復(fù)優(yōu)化了洗脫液配方，提取得到的菌體DNA純度更高，最大限度地去除了蛋白、脂類等雜質(zhì)污染，可以直接應(yīng)用于PCR、熒光定量PCR和各種酶切試驗等。?
操作步驟：
1. 請自行準(zhǔn)備：無水乙醇、異丙醇、PBS及1.5mL離心管。
2. 取出洗滌液，按終濃度70%比例加入無水乙醇，如7.8mL加入18.2mL無水乙醇，充分混勻。
3. 菌體處理：將收集的細(xì)菌或真菌12,000 rpm離心2分鐘，棄上清，加入200μLPBS，振蕩混勻，12,000 rpm離心2分鐘，徹底棄上清。
4. 加入100μL裂解液Ⅰ，強烈Vortex，直到沉淀完全懸浮，無明顯塊狀沉淀，再加入裂解酶10μL，充分混勻，室溫放置20分鐘。
5. 加入200?μL 裂解液Ⅱ，20μL復(fù)合消化液，充分混勻，65℃孵育20分鐘。
6. 加入150μL異丙醇，輕輕顛倒混勻，如有半透明懸浮物，不影響DNA的提取與后續(xù)實驗。
7. 將吸附柱放入收集管內(nèi)，將上述溶液全部轉(zhuǎn)入吸附柱內(nèi)，12,000 rpm 離心1 分鐘，棄收集管內(nèi)廢液。
8. 將吸附柱放回收集管內(nèi)，加500μL 洗滌液至吸附柱內(nèi)，靜置2分鐘，12,000 rpm離心1 分鐘，棄收集管內(nèi)廢液。
9. 將吸附柱放回收集管內(nèi)，加500μL 洗滌液至吸附柱內(nèi)，12,000 rpm 離心1 分鐘，棄收集管內(nèi)廢液。同時，按每份樣本40μL 取洗脫液（如10份提取樣本，即取400μL洗脫液），放置于滅菌1.5mL離心管，65℃預(yù)熱。
10. 將吸附柱放回收集管內(nèi)，12,000 rpm 離心2 分鐘，離去殘留的洗滌液。
11. 取出吸附柱，放入新的1.5 mL 離心管內(nèi)，加入上述預(yù)熱的40 μL洗脫液，靜置2分鐘，12,000 rpm 離心2分鐘，收集DNA溶液。提取的DNA即可用于下一步實驗或-20℃保存。
注意事項：
1. 裂解液、洗滌液含有刺激性化學(xué)物質(zhì)，操作過程請做好防護措施，避免直接接觸皮膚，防止吸入口鼻。如不慎沾染皮膚或眼睛，請立即用清水或生理鹽水沖洗，必要時請就醫(yī)。
2.洗滌液最好現(xiàn)用現(xiàn)配，按需計算用量后配制。加入乙醇后的洗滌液如使用不完，2-8℃密封保存不超過1周。
3. 細(xì)菌量建議不高于107。
