上周,有同學(xué)問我“實(shí)驗(yàn)怎么樣?”
我說“這里的山路十八彎,這里的水路九連環(huán)?!?/p>
說著說著,我自己就唱起來了。
來,一起唱??!
今天說一說我這一個(gè)月以來養(yǎng)細(xì)胞的種種。
上學(xué)期用細(xì)胞A做實(shí)驗(yàn),沒做出理想的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,原因大致有兩個(gè),暫時(shí)還不能確定是哪一個(gè)。
先換細(xì)胞B試一試。
8月25號,從蘭州開會完回來,開始復(fù)蘇細(xì)胞。
在凍存細(xì)胞的液氮罐里找細(xì)胞B,結(jié)果把液氮罐翻了個(gè)底朝天,也沒找到一管細(xì)胞B,肯定是被之前的人用光了。
急著用,那就刷人品吧。
找博士班上的同學(xué)借了一皿細(xì)胞B。(后來去他們實(shí)驗(yàn)室了才發(fā)現(xiàn)同學(xué)的師妹是我們武大下一級的、在我之后也去過泉塘支教的、跟她是微信好友、她知道我長啥樣但是我不知道她長啥樣的化院直系小朱學(xué)妹)細(xì)胞狀態(tài)挺好,長得很快。
可是8月末有其他事,疏于照顧細(xì)胞。結(jié)果它們就為所欲為放浪形骸無拘拘束地復(fù)制繁殖,等到把培養(yǎng)皿里面的營養(yǎng)消耗沒了,還不見有人給它們傳代和換液,就絕食以死相抗了。
忙完事情之后,我再來看它們,發(fā)現(xiàn)它們都死了。
不好意思再找同學(xué)借了。
細(xì)胞B沒了,再看看上學(xué)期用的細(xì)胞A行不行吧。
液氮罐里還有凍存著的細(xì)胞A。
雖然細(xì)胞A沒做出來實(shí)驗(yàn)結(jié)果,但以目前的證據(jù)并不能證明細(xì)胞A就一定不行。
于是想著用細(xì)胞A再試一遍,規(guī)范一下各方面的操作,看能不能做出比較好的實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象出來。
復(fù)蘇細(xì)胞A,第一天大部分都貼壁,看著還可以。
第二天換液之后,細(xì)胞陸陸續(xù)續(xù)都飄起來了,死了。
復(fù)蘇失敗。
不甘心。
再復(fù)蘇一瓶,重復(fù)之前的現(xiàn)象。
再次復(fù)蘇失敗。
與此同時(shí),購買細(xì)胞B。
由于之前在協(xié)和細(xì)胞中心買細(xì)胞周期太長,這次問了下實(shí)驗(yàn)室同學(xué),被告知可以從武漢某生物公司購買細(xì)胞,費(fèi)用貴三分之一,但直接打電話下單即可,比協(xié)和的流程簡單不止一點(diǎn)點(diǎn),且貨期短,到貨快。
于是在復(fù)蘇第一管細(xì)胞A的同時(shí),從生物公司訂購了細(xì)胞B。
細(xì)胞B一個(gè)周就到貨了。一同來的還有實(shí)驗(yàn)室另外一個(gè)同學(xué)的細(xì)胞C。
在烘箱里穩(wěn)定3個(gè)小時(shí)之后,見細(xì)胞B差不多可以傳代了,便1傳2。
1傳2的細(xì)胞密度很大,理論上不應(yīng)該有什么問題。
第二天,細(xì)胞有一些貼壁了,有一些沒有貼壁。
第三天,貼壁了的細(xì)胞慢慢地都飄起來了,貼壁的細(xì)胞越來越少。
第四天,活細(xì)胞數(shù)已經(jīng)很少,可以宣告細(xì)胞養(yǎng)活失敗的結(jié)論了。
實(shí)驗(yàn)室另外一個(gè)同學(xué)的細(xì)胞C情況更為嚴(yán)重,只是換了個(gè)液,第二天就死了。
我們斷定是這家生物公司的細(xì)胞質(zhì)量不好,跟公司反饋了情況之后,對方同意重發(fā)一次。
這時(shí)候,細(xì)胞B死了,又沒有細(xì)胞用了。
從液氮罐里第三次取出一管凍存的細(xì)胞A,這次小心翼翼地復(fù)蘇,什么環(huán)節(jié)都謹(jǐn)慎處理,希望能夠復(fù)蘇成功。
第二天希望的氣球還在,第三天希望的泡沫破碎。
同前兩次一樣,先貼壁,然后飄起,最后都死了。
另外兩個(gè)養(yǎng)細(xì)胞的同學(xué)從液氮罐里面取出的細(xì)胞也都復(fù)蘇失敗。
我稍感安慰,這至少證明不是我的操作問題。
但安慰感不到一會兒便被我還是沒有細(xì)胞可用的現(xiàn)實(shí)給澆滅了。
此時(shí),我無比英明神武地做出了一個(gè)決定,不再傻乎乎地等生物公司重發(fā)的那瓶細(xì)胞到貨,而是下單從協(xié)和買。
我一共從協(xié)和買過三次細(xì)胞,第一次用了三四周,第二次用了兩周,這一次,差不多一個(gè)周,那邊的老師就通知去取細(xì)胞。
同一天到的,還有生物公司重發(fā)的那瓶。
然后我就有了兩瓶細(xì)胞B。一瓶是從協(xié)和買的,一瓶是從生物公司買的。
這兩瓶細(xì)胞長得都還不錯(cuò),當(dāng)天就得傳代。
協(xié)和買來的細(xì)胞傳代下來,長勢很好。而從生物公司買來的細(xì)胞如第一次買的一樣,傳代之前狀態(tài)還不錯(cuò),傳代之后第二天第三天就不行了,長不起來。
第一次從生物公司買來時(shí)傳完代細(xì)胞就死了,我曾懷疑過是不是我傳代技術(shù)或者所用胰酶的問題。
可是這次協(xié)和的和生物公司的細(xì)胞我是同批次傳代的,前者細(xì)胞能長起來,后者就不行。
加上實(shí)驗(yàn)室同學(xué)從生物公司買來的那瓶細(xì)胞C也沒養(yǎng)活,基本上可以排除我的操作技術(shù)和胰酶的問題,確定是生物公司細(xì)胞質(zhì)量的問題。
好在從協(xié)和買回來的細(xì)胞長得很正常。
經(jīng)過幾天,傳了兩次,傳到5瓶的時(shí)候,從協(xié)和買回時(shí)自帶的培養(yǎng)基已經(jīng)用完了。我把其中的4瓶凍存下來留著保種,剩下的1瓶接著傳代以便后用。
剩下的這瓶細(xì)胞傳代時(shí),我用的是實(shí)驗(yàn)室自配的培養(yǎng)基(以下簡稱自己的培養(yǎng)基)。
凍存和傳代時(shí),我還留出了一些細(xì)胞。傳了6個(gè)小皿,打算做實(shí)驗(yàn)用。(后來證明這一決定也是非常明智的)
結(jié)果第二天,發(fā)現(xiàn)傳代后的2個(gè)大皿里面的細(xì)胞都死得差不多了。
心塞塞啊。
肯定是換成了自己的培養(yǎng)基,細(xì)胞不適應(yīng),都死了唄。
不報(bào)什么希望地、例行公事般地看看小皿。
因?yàn)橐话闱闆r是,在某一次操作下,大皿比小皿的細(xì)胞長得要好一些。
大皿的細(xì)胞都死了,小皿的還會活著嗎?
唉,小皿的細(xì)胞還真的活著!
6個(gè)小皿里面的細(xì)胞狀態(tài)很不錯(cuò),死細(xì)胞很少。
這就很奇怪了,小皿也是用的自己的培養(yǎng)基啊,怎么就沒死呢?
大皿與小皿的區(qū)別在于大皿用的是大概一個(gè)月前配的培養(yǎng)基,小皿用的是混合培養(yǎng)基(一半是一個(gè)月前配的培養(yǎng)基,一半是新配的培養(yǎng)基)。
因?yàn)橐粋€(gè)月前配的培養(yǎng)基用完了,所以又新配了一瓶。
按之前的經(jīng)驗(yàn)來看,一個(gè)月前配的培養(yǎng)基也應(yīng)該沒什么問題,在冰箱里放一個(gè)月不怎么會變質(zhì)啊。
可是結(jié)果就是這么匪夷所思,大皿里的細(xì)胞死了,小皿里的細(xì)胞還活著。
我想憑借小皿里面的細(xì)胞打個(gè)翻身仗,看看能不能把它們養(yǎng)活。
我取消了本來要用小皿做的實(shí)驗(yàn)。因?yàn)橐坏┳隽藢?shí)驗(yàn),小皿的細(xì)胞就不能用了。
就這么養(yǎng)著它,讓它們長啊長。
中間換了一次液,換液之后,死了一些細(xì)胞,但大部分細(xì)胞還好。
看來細(xì)胞確實(shí)需要適應(yīng)我們自己的培養(yǎng)液一段時(shí)間。
到了昨天,也就是換了培養(yǎng)液之后,洗去了漂浮著的死細(xì)胞。
我把其中的5個(gè)小皿里面的細(xì)胞都弄了下來,轉(zhuǎn)移到一個(gè)大皿里面去。
留了1個(gè)小皿,便于追蹤查看后續(xù)生長狀況。
小皿底面積挺小的,我還擔(dān)心5個(gè)小皿的細(xì)胞數(shù)太少,放到大皿里面去,細(xì)胞密度太低,養(yǎng)不活。
也擔(dān)心嬌氣的細(xì)胞被轉(zhuǎn)移到大皿之后,換了新環(huán)境,水土不服,絕食抗議,以死相爭。
為了給它們一個(gè)舒適的生長環(huán)境,我還千年難得一次地把細(xì)胞間三個(gè)房間的地板用蒸餾水和75%的酒精擦洗了個(gè)干干凈凈。(其實(shí)是看不下去細(xì)胞間地板太臟心血來潮做了個(gè)衛(wèi)生)
臨走的時(shí)候,我看了細(xì)胞一眼。嗯,密度妥妥的夠,可是都還懸浮著,它們能沉下去嗎?
它們怎么還不沉下去貼壁啊?
我心里一點(diǎn)底都沒有啊。
要是他們貼不了壁都死了,可怎么辦啊?如果大皿和小皿的細(xì)胞都死了,我要從液氮罐里把凍存的4管細(xì)胞取出來1管復(fù)蘇嗎?
可是大皿里的細(xì)胞都沒有適應(yīng)自己的培養(yǎng)基。
復(fù)蘇的細(xì)胞就能適應(yīng)嗎?
能適應(yīng)的可能性很小吧?
我忐忑不安地離開了細(xì)胞間。
然而忐忑不安也只是一下下,我離開了細(xì)胞間之后,就把這事兒給忘到腦后了。
直到今天早上來了,我才想起來要去看它們一下。
沒想到,它們乖乖地都貼壁了,只有極少的死細(xì)胞。
可能是感動于我昨天里里外外把細(xì)胞間三個(gè)屋子的地板擦洗得干干凈凈的辛苦,也可能是看不下去我這一個(gè)月以來養(yǎng)細(xì)胞的辛酸和不順,也可能是它們自己不想折騰了,就想歲月靜好現(xiàn)世安穩(wěn)地復(fù)制繁殖一代又一代地活下去。
總之,它們現(xiàn)在的長勢不錯(cuò),看樣子應(yīng)該沒問題了。
希望它們不要再死翹翹了。
希望下周二和下周三的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)?zāi)軌蝽樌?/p>
希望這個(gè)課題的實(shí)驗(yàn)?zāi)軌驁A滿。
希望能夠按期畢業(yè)。
以上。