通常使用Annexin V-FITC / 7-AAD 對凋亡細胞進行染色，用流式檢測陽性染色數，計算IC50。
本人最近在養HUVEC，并檢測某種藥物的IC50，記錄一下步驟。在實驗設計階段，要設置一組只染AnnexinV的孔，和一組什么都不染的空，一定要設置對照組，溶劑組，并且溶劑組和對照組都要染AnnexinV/7-AAD。
1.正常消化細胞，收集細胞到5ml流式管內，350g 5min離心去上清。（離心可不用在細胞房進行）
2.加入200μL 預冷的PBS重懸細胞，并搖勻，再次350g 5min離心去上清；（清洗細胞）
3.加入200μL 1乘的binding buffer（按照說明書配好，本人用的四正柏）再洗一次，注意搖勻，再次離心去上清。
4.加入100μL?1乘的binding buffer重懸，搖勻，吸100μL到96孔板（不同濃度，不同復孔都要換槍頭），加入5μL 的Annexin V-FITC，避光孵育5min。（不同牌子避光孵育時間不一樣）
5.按照每孔4μL 7-AAD和100μL PBS配置好溶液，當避光孵育結束后，每孔加入104μL的溶液，立即上機檢測。本人用的流式是guava，一次性檢測所有孔，中間不能改電壓。
6.測定結束后，可以使用儀器直接畫IC50的圖，也可以使用graph pad計算IC50
