本文參加#感悟三下鄉(xiāng)，青春筑夢行#活動，本人承諾，文章內容為原創(chuàng)，且未在其他平臺發(fā)表過。
時光匆匆，轉眼間為期一個月的暑期社會實踐已經(jīng)落下帷幕。由于我們的暑期社會實踐主要是以實驗為主，所以我們沒有像其他團隊一樣奔波在外。每天都能看到隊友們在實驗室里忙碌的身影。在這一個月里，我們大家都受益匪淺，也真真切切體會到 科研人員工作的辛勞。
一、我們的實踐日常
我們的實驗是研究8種雁形目鳥類nrDNA進化，雖然每天 重復一樣的實驗步驟，但我們并不感到厭煩，相反，我們很享受這個過程。每當實驗成功后，大家在一起歡呼。我想這大概是我們在一起最幸福的時刻了吧！實驗失敗了，我們不氣餒不放棄，我們始終堅信著一定會成功的，勝利就在前面。大家互相鼓勵著，督促著。很幸運，擁有這些隊友。下面我想簡單回憶下過去的一個月的點點滴滴，那些屬于我們的實驗夢。
（一）DNA的提取
總DNA的提取采用改進的CTAB（Cetyl-trimethy-Ammonium Bromide;中文名，十六烷基-三甲基-溴化銨）法，材料為鳥類臟腑。
主要步驟如下：
⑴向2mlEP管中加入1300μl已加巰基乙醇CTAB提取液，靜置待用；
⑵ 取上述鳥類臟腑少許，剪碎，放入研缽，加少許研磨劑，研磨至粉末狀，倒入提取液中，混勻，65℃保溫一個小時左右（保溫過程中需混勻幾次）；
⑶ 將EP管放在普通離心機中，12000rpm，離心10min;
⑷ 取上清液，加CI（氯仿：異戊醇=24：1）至滿管，振蕩10min;
⑸再次離心，10℃，12000rpm,10min;
⑹再取上清液于2ml EP管中，加入等體積CI（氯仿：異戊醇=24：1），振蕩10min;
⑺再次進行步驟⑸；
⑻取上清液于2ml EP管中，加入2/3體積冰異丙醇，于-20℃環(huán)境下沉淀半個小時至一個小時;
⑼在4℃環(huán)境下離心，12000rpm，10min,棄上清液，去沉淀；
⑽用75%乙醇洗滌兩次以上，風干；
⑾再用200μl 0.5×TE溶液溶解。
以上即DNA的總提取過程。
（二）瓊脂糖電泳
⑴ 用電子天平稱取0.3g瓊脂糖，加30ml1×TAE溶液，并搖勻；
⑵將配置好的溶液放在微波爐中加熱兩分鐘至溶液澄清；
⑶稍冷卻后，取少許EB加入溶液中，振蕩均勻；
⑷將溶液加入準備好的制膠槽內，冷卻；
⑸待其凝固后，小心拔去梳齒，使點樣孔保持完好；
⑹點樣后，于120V電壓下進行半小時左右的電泳，后取出置于紫外分析儀下觀察，拍照。
（三）PCR擴增
（1）通過瓊脂糖凝膠電泳的過程將目的DNA片段與其他的雜帶盡量的分開，然后用干凈的手術刀割下含目的DNA瓊脂塊，放入1.5ml離心管中；
（2）加入Binding BufferII 溶液700ul/管，60oC水浴10分鐘，使膠塊融化。水浴時，每2min振蕩一次（動作不能太劇烈）；
（3）將融化的膠溶液轉移至UNIT-10柱中并套放在2ml收集管內，室溫放置2min后，室溫離心一分鐘，8000rpm；
（4）取下UNIT-10柱，倒掉收集管中的廢液后，再次將UNIT-10柱放入收集管中，加入500ul Wash Solution，室溫離心一分鐘，8000rpm；
（5）重復上一步；
（6）取下UNIT-10柱，倒掉收集管中的廢液，將UNIT-10柱放入同一個收集管中，12000rpm室溫離心兩分鐘，自然晾干至無酒精味；
（7）將UNIQ-10柱放入1.5ml離心管中，在柱子膜中央加60oC的Elution Buffer，40ul，靜置5min；
（9）在離心機中室溫離心1min，12000rpm，離心管中的液體即為回收的目的DNA片斷，標上標簽，放入冰箱中待用。
?（四）PCR反應體系
94oC 5分鐘；94oC變性30秒， 54oC退火30秒, 72oC延伸2分鐘, 30個循環(huán)；72oC終延伸10分鐘。
（五）測序
將做好的克隆（每個樣品一個）送到上海生工生物工程技術服務有限公司進行測序工作。
二、總結
一個月的時間磨礪了我們的意志，鍛煉了我們的動手能力，讓我們把課本上學的知識 原理運用到了實踐中。經(jīng)過這次實踐也更加堅定了我們對未來的信念。生物界中有太多的奧妙，等著我們去發(fā)現(xiàn)去體會。
