快速冷凍取決于與冷源接觸的總表面的百分比，水的體積，水樣品的起始溫度以及冷源的溫度。理想情況下，冷源處于非常低的溫度，并被安排接觸所有的表面。一塊骨骼肌中的冰晶偽影由于凍結(jié)太冷而造成的凍結(jié)部分“百葉窗” 盡快切片 ?然而，即使樣本成功地快速冷凍成玻璃狀，也不會(huì)停留在那個(gè)方向。?
玻璃冰是一個(gè)不穩(wěn)定的狀態(tài)。 在以上，非晶冰開始逐漸重建為立方冰，并擴(kuò)張。 在以上，立方冰開始重新形成六角冰，并再次膨脹。 幸運(yùn)的是，這是一個(gè)緩慢的轉(zhuǎn)換過程，取決于溫度梯度和水的純度。 ?
在大多數(shù)常見的應(yīng)用中，組織必須在快速冷凍溫度以上進(jìn)行加熱，以便對(duì)其進(jìn)行分割（大腦為但取決于組織類型）。 否則切割太冷，用刀斜面彎曲時(shí)會(huì)打碎。 切割太冷的明顯癥狀是“百葉窗”或平行于刀片的碎痕。
