熱啟動Taq酶由于能夠很好的解決PCR中常出現的非特異性擴增、引物二聚體形成等問題，同時有效提高了目標基因的擴增成功率及產率，因而一直以來都備受科研人員的青睞。而一種擴增效率高、酶動力強、靈敏度高的熱啟動Taq酶對后續的實驗更是能起到積極的作用。

目前，國內市場上銷售的熱啟動Taq酶的品牌很多，但真正高質量的熱啟動Taq酶并不多，國外品牌有ABI、Bioline等，國內品牌有Starvio、Probegene等。面對各品牌的熱啟動Taq酶，怎么選是關鍵。

選擇高擴增效率的熱啟動Taq酶對PCR、qPCR能否成功很重要。我們實驗室對國內常用品牌的熱啟動Taq酶曾經進行過比較，將人RNase的一個片段質粒5倍梯度稀釋，將qPCR結果做成標準曲線，結果ABI和Starvio熱啟動Taq酶擴增效率都在95%以上，每反應體積能夠檢測的最低量可達2pg（如圖1），而某國際知名品牌T的熱啟動Taq酶的擴增效率只有90%，在模板量為2pg時無擴增曲線。

圖1. StarvioHC熱啟動Taq酶擴增人RNase的一個片段。以1ng人基因組DNA為模板，5倍系列稀釋?？梢?，StarvioHC熱啟動Taq酶具有較高的反應靈敏度（1.6pg），重復性好，線性范圍寬。

除了以高擴增效率為熱啟動Taq酶的選擇標準外，對于酶動力強這一點，我們也曾比較過多家公司的熱啟動Taq酶。在國外品牌中，英國Bioline公司的熱啟動Taq酶（lmmulase）酶動力較好，可做4重PCR，等量起始模板CT30時的熒光信號值最高。在國內品牌中，Starvio熱啟動Taq酶的指數期較長，可支持4重以內的PCR檢測反應、目擴增曲線的“S”型不受影響（圖2）。其它的國產品牌一般只能支持2重反應，在做3重反應時，擴增曲線低矮，熒光信號值較低，無典型擴增曲線，結果很難判定。

圖2. 使用StarvioHC熱啟動Taq酶檢測呼吸道病原體感染。1為內參基因擴增曲線，2為肺炎支原體擴增曲線，3為呼吸道合胞病毒擴增曲線，CT值分別為25.2、26.6、28.8。以上可見，StarvioHC熱啟動Taq酶具有擴增曲線典型，酶動力強勁，適合多重檢測等顯著優點。

此外，靈敏度也是我們在選擇熱啟動Taq酶需要著衡量的標準。有些樣本中目標基因的豐度很低，非?？简灍釂覶aq酶的檢測靈敏度，靈敏度高了，實驗數據自然更加真實可靠。我們將Starvio熱啟動Taq酶與T品牌的熱啟動Taq酶進行對比（如圖3）：同一份呼吸道拭子樣本，用Taqman探針法檢測肺炎支原體，?Starvio熱啟動Taq酶比T品牌的熱啟動DNA聚合酶檢測結果早2個CT。可見，Starvio熱啟動Taq酶擁有超高的靈敏度，較部分同類化學封閉的熱啟動DNA聚合酶相比，更適合用于低豐度樣本的檢測。

圖3.?同一份呼吸道拭子樣本，Taqman探針法檢測肺炎支原體，?StarvioHC熱啟動Taq酶（1）比知名品牌供應商T熱啟動DNA聚合酶（2）檢測結果早2個CT。

總的來說，目前國內市場上比較知名的國外品牌如ABl、Bioline等公司的熱啟動Taq酶性能較好，國產熱啟動Taq酶中，Starvio熱啟動Taq酶的擴增性能不錯，與國外名牌產品無明顯差異，其它很多國產品牌的擴增性能不夠理想，研究者需根據自己的實驗要求和經費情況進行選擇，最好做一個梯度稀釋擴增實驗，以檢測熱啟動Taq酶的擴增效率和靈敏度。