功能:用來進行酵母雙雜,研究蛋白之間的互作。或者用來進行轉錄因子的轉錄激活驗證實驗。
AH109:本身是色氨酸(Trp)和亮氨酸(Leu)缺陷的菌株,無法在缺少色氨酸和亮氨酸的培養基中生長,也就可以用來進行轉化篩選。
轉化標簽:GAL4-BD-PGBKT7-色氨酸(Trp),如果轉化成功,則說明能夠表達Trp基因,從而存活(轉錄激活使用此載體進行)。GAL4-AD-PGADT7-Leu(亮氨酸),如果轉化成功,則能夠在缺少亮氨酸的條件下生長,因此在進行酵母雙雜的時候,要在雙缺的板上來篩選陽性克隆。
報告基因:lacZ, HIS3, ADE2, MEL1。如果轉化成功且具有轉錄激活活性,則可以激活報告基因,在缺少His和Trp的培養基上生長,且能夠使LacZ基因表達,從而能夠和X-Gal進行顯示反應,直觀表明具有轉錄激活活性。
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