R 學習 - 散點圖

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散點圖

散點圖在生物信息分析中是應用比較廣的一個圖,常見的差異基因火山圖、功能富集分析泡泡圖、相關性分析散點圖、抖動圖、PCA樣品分類圖等。凡是想展示分布狀態的都可以用散點圖。

橫縱軸都為數字的散點圖解析

繪制散點圖的輸入一般都是規規矩矩的矩陣,可以讓不同的列分別代表X軸、Y軸、點的大小、顏色、形狀、名稱等。

輸入數據格式 (使用火山圖的輸入數據為例)

火山圖需要的數據格式如下

id: 不是必須的,但一般的軟件輸出結果中都會包含,表示基因名字。

log2FoldChange: 差異倍數的對數,一般的差異分析輸出結果中也會給出對數處理的值, 因此程序沒有提供這一步的計算操作。

padj: 多重假設檢驗矯正過的差異顯著性P值;一般的差異分析輸出結果為原始值,程序提供一個參數對其求取負對數。

significant: 可選列,標記哪些基因是上調、下調、無差異;若無此列或未在參數中指定此列,默認程序會根據padj列和log2FoldChange列根據給定的閾值自動計算差異基因,并作出不同顏色的標記。

label: 可選列,一般用于在圖中標記出感興趣的基因的名字。非-行的字符串都會標記在圖上。

volcano="id;log2FoldChange;padj;significant;label

E00007;4.28238;0;EHBIO_UP;A

E00008;-1.1036;0.476466843393901;Unchanged;-

E00009;-0.274368;1;Unchanged;-

E00010;4.62347;7.37606076333335e-103;EHBIO_UP;-

E00012;0.973987;0.482982440163204;Unchanged;-

E00017;-1.30205;0.000555693857439792;Baodian_UP;B

E00024;0.617636;2.78047837287061e-13;Unchanged;-

E00033;1.48669;2.56000581595275e-60;EHBIO_UP;-

E00034;-0.783716;0.00341521725291801;Unchanged;-

E00036;2.01592;6.03136656016401e-06;EHBIO_UP;C

E00040;-1.89657;4.73663890849056e-21;Baodian_UP;-

E00041;-0.268168;0.563429434558031;Unchanged;-

E00042;0.0861048;0.367700939634328;Unchanged;-

E00043;-1.19328;1.42673872027352e-153;Baodian_UP;-

E00044;-0.887981;2.43067804654905e-26;Unchanged;-

E00047;-0.610941;5.51696648645932e-57;Unchanged;-"# 數據的讀取之前的R語言統計和繪圖系列都已解釋過,不再贅述

# 文末也有鏈接可直達之前的文章,新學者建議從頭開始volcanoData<-read.table(text=volcano,sep=";",header=T,quote="",check.names=F)head(volcanoData)

id log2FoldChange? ? ? ? ? padj significant label

1 E00007? ? ? 4.282380? 0.000000e+00? ? EHBIO_UP? ? A

2 E00008? ? ? -1.103600? 4.764668e-01? Unchanged? ? -

3 E00009? ? ? -0.274368? 1.000000e+00? Unchanged? ? -

4 E00010? ? ? 4.623470 7.376061e-103? ? EHBIO_UP? ? -

5 E00012? ? ? 0.973987? 4.829824e-01? Unchanged? ? -

6 E00017? ? ? -1.302050? 5.556939e-04? Baodian_UP? ? B

繪制散點圖,只需要指定X軸和Y軸,再加上geom_point即可。

library(ggplot2)p<-ggplot(volcanoData,aes(x=log2FoldChange,y=padj))p<-p+geom_point()# 前面是給p不斷添加圖層的過程

# 單輸入一個p是真正作圖

# 前面有人說,上面都輸完了,怎么沒出圖

# 就因為差了一個pp

說好的火山圖的例子,但怎么也看不出噴發的態勢。

對數據坐下預處理,差異大的基因padj小,先對其求取負對數,所謂負負得正,差異大的基因就會處于圖的上方了。

# 從示例數據中看到,最小的padj值為0,求取負對數為正無窮。

# 實際上padj值小到一個點對我們來講就是個數

# 所以可以給所有小于1e-6的padj都讓其等于1e-6,再小也沒意義

#volcanoData[volcanoData$padj<1e-6,"padj"]<-1e-6volcanoData$padj<-(-1)*log10(volcanoData$padj)

數據中基因的上調倍數遠高于下調倍數,使得出來的圖是偏的,這次畫圖時調整下X軸的區間使圖對稱。

p<-ggplot(volcanoData,aes(x=log2FoldChange,y=padj))+geom_point()+xlim(-4.7,4.7)p

有點意思了,數據太少不明顯,下一步加上顏色看看。

p<-ggplot(volcanoData,aes(x=log2FoldChange,y=padj))+geom_point(color=significant)+xlim(-4.7,4.7)p

利用現有的數據,基本上就是這個樣子了。雖然還不太像,原理都已經都點到了。

盜取火山圖繪制一文中的圖來顯示個真正的火山圖吧。這樣一步步繪制很麻煩,去看一步法吧。

橫縱軸都為字符串的散點圖展示

輸入數據格式如下

這個數據是前面講到的FASTQC結果總結中的直觀的查看所有樣品測序堿基質量和GC含量的散點圖的示例數據。

fastqc<-"ID;GC_quality;Base_quality

ehbio_1_1;PASS;PASS

ehbio_1_2;PASS;PASS

ehbio_2_1;WARN;PASS

ehbio_2_2;WARN;PASS

Other_1_1;FAIL;FAIL

Other_1_2;FAIL;FAIL"fastqc_data<-read.table(text=fastqc,sep=";",header=T)# 就不查看了

p<-ggplot(fastqc_data,aes(x=GC_quality,y=Base_quality))+geom_point()p

六個點少了只剩下了3個,重疊在一起了,而且也不知道哪個點代表什么樣品。這時需要把點抖動下,用到一個包ggbeeswarm,抖動圖的神器。

library(ggbeeswarm)p<-ggplot(fastqc_data,aes(x=GC_quality,y=Base_quality))+geom_quasirandom()# 使用geom_text增加點的標記

# label表示標記哪一列的數值

# position_quasirandom獲取點偏移后的位置

# xjust調整對齊方式; hjust是水平的對齊方式,0為左,1為右,0.5居中,0-1之間可以取任意值。vjust是垂直對齊方式,0底對齊,1為頂對齊,0.5居中,0-1之間可以取任意值。

# check_overlap檢查名字在圖上是否重疊p<-p+geom_text(aes(label=ID),position=position_quasirandom(),hjust=0,check_overlap=T)p

一網打進散點圖繪制

假如有一個輸入數據如下所示(存儲于文件scatterplot.xls中)

Samp Gene1 Gene2 Color Size GC_quality Base_quality

a 1 1 grp1 10 PASS PASS

b 2 2 grp1 10 PASS PASS

c 1 3 grp1 10 WARN PASS

d 3 1 grp2 15 WARN WARN

e 2 2 grp2 15 PASS WARN

f 3 3 grp3 5 PASS PASS

g 2 1 grp3 5 WARN PASS

想繪制樣品在這兩個Gene為軸的空間的分布,并標記樣品的屬性,只需要運行如下命令

# -f: 指定輸入文件,列數不限,順序不限; 第一行為列名字,第一列無特殊要求,必選# -X: 指定哪一列為X軸信息,必選# -Y: 指定哪一列為Y軸信息,必選# -c: 指定用哪一列標記顏色,可選# -s: 指定哪一列標記大小,一般為數字列,可選# -S: 指定哪一列標記形狀,可選# -L: 指定哪一列用來作為文本標記# -w, -u: 指定圖的長寬sp_scatterplot2.sh -f scatterplot.xls -X Gene1 -Y Gene2 -c Color -s Size -S GC_quality -L Samp -w 10 -u 10

如果橫縱軸為字符串,且有重復, 則需指定參數-J TRUE以錯開重疊的點,具體如下

# -O: 指定X軸變量的順序, 默認是字母順序# 其它列或其它屬性的順序也可以用相應的方式指示,具體看程序的幫助提示# -c Gene1: 用特定基因的表達對點著色,單細胞分析圖中常用# -J TRUE: 見上# -Z FALSE:默認使用geom_text_repel添加點的標記,及其智能,不會出現標簽過多覆蓋的情況# 但對jitterplot,會有些沖突,所以在`-J TRUE`且出來的圖中點的標簽不符合預期時,設定# 次參數為FALSE,使用geom_text標記點。sp_scatterplot2.sh -f scatterplot.xls -X GC_quality -Y Base_quality -O"'WARN', 'PASS'"-c Gene1 -w 10 -u 10 -J TRUE -L Samp -Z FALSE

只有想不到,沒有做不到,sp_scatterplot2.sh還可以完成更多你想做的散點圖,而且只需調參數,無需改代碼,簡單可重用。

轉發獲取,不用再重復了

Reference

http://blog.genesino.com/2017/07/scatterPlot

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