如何確定RNA的質(zhì)量

一般而言,主要從總量、純度和完整度三個方面來評價:

一、總量。主要看OD260值。

二、純度。看OD260/OD230的值,比較有機物的污染;看OD260/OD280的值,比較蛋白質(zhì)污染。

三、完整性。以agilent bioanalyzer進行毛細管電泳(capillary electrophoresis),并以軟件的RIN(RNA integrity number)分數(shù)評估,10分為完整性最好,0分為最差。


ODoptical density的縮寫,表示被檢測物吸收的光密度。

http://baike.baidu.com/link?url=wCDIeKd-ciEHAI3X2ZtStbp4v8NJ4LvXFJaVAt4PE6gOPvpW6eRHEMhvKLkgB7x10GlTM2Ecyt4BcD4oxU_NTxQlNgyNTgQi3ljng-QRh2e

光通過被檢測物,會吸收一些光,前后的能量差異就是被檢測物吸收的能量;又 不同的物質(zhì),它的OD(吸光度或稱光密度)是不一樣的;在特定波長下,特定物質(zhì)的濃度與OD值成正比。


OD 230 ?表示其他碳源物質(zhì)的光密度。

OD 260 ?表示核酸的光密度。

OD 280 ?表示蛋白質(zhì)的光密度。

OD 320 ?表示鹽的光密度。

我們看RNA的質(zhì)量主要看OD 260/OD 280,即核酸與蛋白的比例,純值為2,(1.8~2.1為可接受范圍)。

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